ECL超敏發(fā)光液

ECL超敏發(fā)光液使用說明

保存條件：2－8度保存有效期12個月

產品簡介

ECL化學發(fā)光液在HRP的催化下發(fā)生化學反應而發(fā)光，可用于檢測固定在膜上的蛋白質等生物大分子。使用照相技術（X-光膠片曝光）或者其他成像方法（如熒光或化學發(fā)光成像儀）進行檢測。

我們的是在普通的化學發(fā)光液基礎之讓改進而來，相對于普通發(fā)光液來說，靈敏度更高，檢測下限更低，可達到pg級別的抗原，并且一抗和二抗的稀釋度更高。

本產品在5分鐘后光強達到zui大，在30分鐘時光強還能維持80%（以5分鐘時光強為基礎）。zui終發(fā)光時長可達一小時。

操作步驟

1.在二抗孵育完畢后，將發(fā)光液從冰箱取出到室溫平衡。將印跡膜充分洗滌。

2.根據需要量，將A和B按照1：1的比例等體積混合，配制為化學發(fā)光檢測底物工作液（例如：一張8cm×6cm的膜使用2ml工作液，為節(jié)省試劑，初次實驗可用洗滌緩沖液測試，以zui少的液體蓋住整個膜的表面）。

3.棄去洗滌緩沖液，轉移到暗室或者避光盒里操作，將發(fā)光底物工作液滴加在印跡膜上，確保工作液覆蓋整張膜，室溫孵育5分鐘。

4.去掉多余發(fā)光底物工作液，將印跡膜置于兩層干凈的塑料薄膜之間，此過程應小心完成，避免膜與膜之間產生氣泡。

5.在暗室內進行X-光膠片曝光，或將膜放置到熒光、化學發(fā)光成像儀內，按照儀器說明書進行檢測。

6.因本產品發(fā)光發(fā)光超度高，發(fā)光時間長，所以為得到理想的結果，可多次曝光（不同時長）以得到理想的結果。

注意事項

1.為獲得*實驗結果，請務必優(yōu)化實驗條件，包括檢測樣品的用量、一抗、二抗稀釋度、雜交膜及封閉試劑的選擇，并且發(fā)光液請現用現配。

2.建議在封閉緩沖液及所有抗體稀釋液中加入高質量的吐溫-20（終濃度為0.05%），以減少非特異性結合。

3.由于疊氮鈉是HRP抑制劑，在緩沖液中應避免使用疊氮鈉作為防腐劑。

4.免疫印跡實驗進行全過程中，請確保印跡膜始終處于濕潤狀態(tài)，避免干燥。

5.在與膜發(fā)生接觸過程中請佩戴手套或者使用潔凈鑷子，避免蛋白污染。

6.實驗過程中，請使用潔凈器材。保證非金屬設備沒有明顯劃痕，金屬設備表面無銹。銹可能導致膜上帶有污點或者高背景。