SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 BL508A

SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 BL508A 現(xiàn)貨

SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 BL508A SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒 50T 別名：SDS-PAGE Gel Kit 產(chǎn)品簡介： SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒提供了配制 SDS-PAGE 凝膠所需的各種試劑，用戶只需自備制 膠器具和蒸餾水，即可配制 PAGE 膠(即聚丙烯酰胺凝膠)。 SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒不僅可用于配制 SDS-PAGE 凝膠，也可用于配制非變性 (native)PAGE 凝膠。 本試劑盒約可配制 30-50 塊常規(guī)大小的 PAGE 膠。 產(chǎn)品組分： 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 保存條件 BL508A-1 30% Acr-Bis (29:1) 100 ml 4℃ BL508A-2 1M Tris-HCl, pH8.8 100 ml RT BL508A-3 10% SDS 5 ml RT BL508A-4 Ammonium persulfate (過硫酸銨) 0.5 g RT BL508A-5 TEMED 0.5 ml 4℃，避光 BL508A-6 1M Tris-HCl, pH6.8 15 ml RT 使用說明： 一、配制分離膠 1、根據(jù)目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度，再按照下面的表格配制 SDS-PAGE 的分離膠(即下層膠)： 不同濃度的 SDS-PAGE 分離膠的*分離范圍 SDS-PAGE 分離膠濃度 *分離范圍 6%膠 50-150kD 8%膠 30-90kD 10%膠 20-80kD 12%膠 12-60kD 15%膠 10-40kD 配制分離膠前，根據(jù)以下配方準(zhǔn)備 10% APS： 10% APS 配制-5 ml：將 0.5 gAPS 干粉溶于 5 ml 滅菌水中，*溶解后分裝，1 ml/支， -20℃?zhèn)浯妫看稳∫还苁褂谩?0% APS 應(yīng)盡量減少室溫存放時間，以防失效。10%APS 在 4℃ 有效期為一周，-20℃有效期 6 個月。若發(fā)現(xiàn)凝膠聚合時間延長，應(yīng)考慮更換使用-20 度保 存的 10%APS。 2、制備分離膠步驟： （1）參照凝膠模具說明書，裝配好凝膠模具。 （2）根據(jù)表二，將不同體積的成分在小燒杯或試管中混合；先后加入 TEMED 和 10%APS， 輕輕攪拌使其混勻，避免產(chǎn)生氣泡

（3）在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液（對于 mini-gel，凝膠液加至約距前玻璃板頂 端 1.5 cm 或距梳齒約 0.5 cm 即可），然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層 1-5 cm 的水層，使 凝膠表面保持平整。 （4）靜置 30-60 分鐘，待分離膠和水層之間出現(xiàn)一個清晰的界面后，說明凝膠已聚合。 注：凝膠的聚合時間與環(huán)境溫度有關(guān)。夏天溫度較高時，聚合較快；冬天氣溫低時，聚 合時間會延長。可以根據(jù)環(huán)境溫度的不同調(diào)節(jié) APS 的加入量。 SDS-PAGE 分離膠配方表 組份 不同凝膠體積對應(yīng)各組份的取樣量（ml） 8%膠 5ml 10ml 15ml 20ml H2O 1.7 3.3 5 6.7 1M Tris pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 30％ PAA（29:1） 1.3 2.7 4 5.3 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 TEMED 0.005 0.01 0.015 0.02 10％ APS 0.05 0.1 0.15 0.2 10%膠 5ml 10ml 15ml 20ml H2O 1.3 2.7 4 5.3 1M Tris pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 30％ PAA（29:1） 1.7 3.3 5 6.7 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 TEMED 0.005 0.01 0.015 0.02 10％ APS 0.05 0.1 0.15 0.2 12%膠 5ml 10ml 15ml 20ml H2O 1 2 3 4 1M Tris pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 30％ PAA（29:1） 2 4 6 8 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 10％ APS 0.05 0.1 0.15 0.2 15%膠 5ml 10ml 15ml 20ml H2O 0.5 1 1.5 2 1M Tris pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 30％ PAA（29:1） 2.5 5 7.5 10 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 10％ APS 0.05 0.1 0.15 0.2

注：如果配制非變性膠，參考上述配方，不加 10%SDS 即可配制成非變性 PAGE 膠。 二、濃縮膠制備： 1、去除覆蓋在分離膠上的水層。 2、按照表三將不同成分在一個小燒杯或試管中混合；先后加入 TEMED 和 10%過硫酸銨， 輕輕攪拌使其混勻，避免產(chǎn)生氣泡。 3、將濃縮膠溶液加至分離膠的上面，直至凝膠溶液到達前玻璃板的頂端。 4、將梳子插入凝膠內(nèi)，避免產(chǎn)生氣泡。 5、靜置 30-60 分鐘，等待濃縮膠聚合。 注：凝膠的聚合時間與環(huán)境溫度有關(guān)。夏天溫度較高時，聚合較快；冬天氣溫低時，聚 合時間會延長。可以根據(jù)環(huán)境溫度的不同調(diào)節(jié) APS 的加入量。 SDS-PAGE 濃縮膠(5%)配方表 組份 不同凝膠體積對應(yīng)各組份的取樣量（ml） 2 ml 4 ml 6 ml 10 ml H2O 1.4 2.7 4.1 6.8 30% PAA（29:1） 0.33 0.67 1 1.7 1M Tris pH6.8 0.25 0.5 0.75 1.25 10% SDS 0.02 0.04 0.06 0.1 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.01 10% APS 0.02 0.04 0.06 0.1 注意事項： 1、過硫酸銨配制成 10%溶液后，應(yīng)當(dāng)-20℃保存。同時應(yīng)盡量減少室溫存放時間，以防 失效。 2、TEMED 易揮發(fā)，使用后請蓋緊瓶蓋。另外凝膠凝聚的速度和溫度及光照關(guān)系密切， 可通過適當(dāng)調(diào)節(jié) TEMED 的用量，控制在不同的室內(nèi)環(huán)境下凝膠凝聚的速度。 3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 保存條件： 1M Tris-HCl, pH8.8、10% SDS、Ammonnium persulfate (過硫酸銨)和 1M Tris-HCl， pH6.8 室溫保存。30% Acr-Bis (29:1)和 TEMED 4℃避光保存。過硫酸銨配制成 10%溶液后， 分裝成小管-20℃保存，半年內(nèi)有效。

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